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PCR仪有哪些类型?

发布时间:17-05-11 17:49分类:技术文章 标签:PCR仪,PCR仪有哪些类型?
根据DNA扩增的目的和检测的标准可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR,实时荧光定量PCR仪等几类。1、普通PCR仪一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。主要是用作简单的,对目的基因退火温度的扩增。主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。2、梯度PCR仪一次性PCR扩增可以设臵一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNA片段其*适合的退火温度不同,通过设臵一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增*可以筛选出表达量高的*适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。在不设臵梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。真正的梯度,是每一排管都有精确的加热控温探头,2009年为止只有美国ABI公司可以做到。其他的都是从两头的热传递来设计控温。梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。3、原位PCR仪(有些品牌的PCR仪具有普通PCR、梯度PCR、原位PCR的功能,通过替换模块进行多用途开展实验工作)是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪。如病原基因在细胞的位臵或目的基因在细胞内的作用位臵等。可保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位臵进行基因扩增。不但可以检测到靶DNA,还能标出靶序列在细胞内的位臵。于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有着重大的实用价值。4、实时荧光定量PCR仪(fluorescencerquantitivepolymerasechainreaction,FQPCR)在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。荧光定量PCR仪有单通道,双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,实现一次检测多种目的基因的功能。实时荧光定量PCR仪主要应用于临床医学检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等。实时荧光定量PCR仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件,构成PCR-DNA/RNA实时荧光定量检测系统。

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PCR仪作为分子生物学相关实验的常规仪器,每年都有数千台的选购量,但是如何选择PCR仪,相信大家在选择时还有一些困惑。PCR仪作为一种精密仪器,操作时应该注意什么?下面小编从几个方面为大家整理了几点关于PCR仪的注意事项。

如何选择自己适用的PCR仪呢?

首先要考虑的是基本需要,如样本管的种类,样本容量等,这些基本需要选择错了,仪器就没法用了,有些仪器的加热模块是可以方便更换的,也可以一台主机配两个加热模块。

其次则是功能性,如温度梯度功能、可调热盖功能、计算控温与模块控温、断电保护功能、软件功能等,这些功能会在实验过程中给用户带来比较多的方便,提高效率从而节约时间。

再次就是价格、维修及使用寿命等了,这些可以都归为钱的问题,如使用命、电源可靠性、维修成本与保修时间等,如果经费不多,就应该将它们排在前面。但在考虑这些因素时也应该考虑长期和短期省钱的问题。

另外一些就是温度的准确性与精确性、升降温速率等了,其实也与钱有关,一般价格高一点的,这两方面会好一些,但过分追求这方面性能则意义不大,前面已经提到了。

最后是噪音大小、外观、是否显脏等,要看个人的喜好了。

还有一个很重要的因素不在仪器的性能之内,就是厂家或代理商的售后服务承诺及服务能力,如保养服务、元件级维修能力等。这是使用者都明白的,但有时仪器采购人员过多注重于表面价格,其实应该将隐性的成本考虑在内。

常见几种PCR仪分类

常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。

澳门新蒲京官网网址,普通PCR仪

一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。主要是用作简单的,对目的基因退火温度的扩增。

主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。

梯度PCR仪

一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNApian段其最适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的最适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。正真的梯度,是每一排管都有精确的加热控温探头,2009年为止只有美国ABI公司可以做到。其他的都是从两头的热传递来设计控温。

梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。

实时荧光定量PCR仪

在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。

荧光定量PCR仪有单通道,双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,实现一次检测多种目的基因的功能。

实时荧光定量PCR仪主要应用于临床医学检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等。

原位PCR仪

是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪。如病原基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。可保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位置进行基因扩增。不但可以检测到靶DNA,还能标出靶序列在细胞内的位置。于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有着重大的实用价值。

PCR仪的一些主要需要考虑的因素做简单的说明:

1、 样本管的种类:

现在主要有0.2ml和0.5ml两种,使用0.5ml PCR管的人员已经很少了,一是0.5ml
PCR专用的薄壁管很少见,二是如果想要较大体积的PCR产物,可以通过多分几个0.2ml
PCR管来实现。
除非经常需要较大体积的PCR产物,否则可以不必考虑0.5ml型的PCR仪

2、 样本容量:

种类很多,0.2ml的有96孔和48孔,0.5ml的有60孔和30孔,384孔等,当然还有一些其他组合:如0.2ml的48孔与0.5ml的30孔组合。

3、 温度梯度功能:

即不同列或不同行之间温度可以为不同的温度。这一功能对于固定PCR程序的检验人员来讲,可能用处不大,但对于经常进行不同基因扩增的研究人员来讲可以说是必须的。

4、 计算控温与模块控温: